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Tipo do documento: Dissertação
Título: Análise da microbiota intestinal em paciente com doença de Crohn pré e pós-transplante de medula óssea
Autor: Faria, Mikaell Alexandre Gouvea 
Primeiro orientador: Casella, Tiago
Primeiro membro da banca: Mattos, Luiz Carlos de
Segundo membro da banca: Santi, Milena Polotto de
Resumo: Devido a importancia da microbiota intestinal na patogenese de doencas inflamatorias intestinais, como a doenca de Crohn, terapias que manipulam a microbiota tem sido investigadas, incluindo o uso de probioticos e prebioticos, com evidencia variavel para sua eficacia. O transplante de celulas tronco hematopoieticas pode ser usado como um importante recurso de tratamento para doenca de Crohn. Apos o procedimento, o paciente reestabelece-se da enfermidade, como se fizesse um reinicio na historia da doenca voltando ao estado anterior ao seu aparecimento. A microbiota pode acompanhar esta melhora, visto que e esperado um perfil durante a doenca e que possa se reestabelecer apos o procedimento. Objetivo: Foi avaliar a microbiota de uma paciente pre e pos transplante de celulas precursoras hematopoieticas (TCPH), em busca de dados sobre a microbiota de paciente doente, antes do TCPH, e de paciente em remissao profunda apos transplante. Metodologia: Para analise clinica, a identificacao de bacterias do doador foi realizada antes do transplante, seguida de coleta de fezes antes do TCPH, 9 meses apos o transplante. A gravidade clinica da doenca de Crohn foi avaliada por IADC. Para analise molecular foi realizada a extracao do DNA das fezes da paciente, seguido de clonagem da biblioteca 16S rRNA, sequenciamento de DNA e analise filogenetica. Para analise de dados foram utilizados calculos de frequencia absoluta e relativa, e testes parametricos e/ou nao parametricos considerando p < 0,05 para valores significantes. Resultados: Apos o TCPH, houve mudanca da microbiota intestinal da paciente do presente estudo, principalmente no aumento das bacterias dos generos Bacteroides, Prevotella, Ruminococcus, Blautia, Faecalibacterium, Parabacteroides, Oscillospira, Veillonella e Eubacterium. Alem disso, o indicador importante de saude da microbiota intestinal foi o percentual somado dos filos Firmicutes e Bacteroidetes (F+B) em relacao ao total, cuja faixa normal deve situar-se entre 85% a 95%. Neste sequenciamento, o indicador F+B encontrou-se dentro da faixa desejavel apos a TCPH. Os resultados tambem contemplam que houve diferenca estatistica significativa entre todas as comparacoes taxonomicas dentro de cada nivel taxonomico (gAntesh vs. gAposh), com p<0,05 para dados na.o-parametricos. Conclusao: O presente estudo demonstrou a importancia da investigacao da microbiota na doenca de Crohn, uma vez que a etiologia exata destas doencas ainda nao e totalmente compreendida. Deste modo, houve uma melhor composicao da microbiota, apos o TCPH gerando uma discussao se a atividade da doenca leva a uma alteracao de microbiota ou se a sua melhora tem relacao com o resultado do procedimento ou ainda se pode manter mais estavel o resultado do TCPH.
Abstract: Due to the importance of intestinal microbiota in the pathogenesis of inflammatory bowel diseases, such as Crohn's disease, therapies that manipulate the microbiota have been investigated, including the use of probiotics and prebiotics, with variable evidence for their efficacy. Hematopoietic stem cell transplantation can be used as an important treatment resource for Crohn's disease. After the procedure, the patient reestablishes the disease, as if the history of the disease is resumed, returning to the state before its onset. The microbiota can accompany this improvement since a profile is expected during the disease and can be reestablished after the procedure. Objective: The aim of this study was to evaluate the microbiota of a patient pre and post hematopoietic precursor cell transplantation (TCPH), seeking data on the microbiota of a sick patient before TCPH and a patient in deep remission after transplantation. Methodology: For clinical analysis, identification of donor bacteria was performed prior to transplantation, followed by stool collection prior to TCPH, 9 months after transplantation. The clinical severity of Crohn's disease was assessed by IADC. For molecular analysis, DNA extraction from the patient's stool was performed, followed by cloning of the 16S rRNA library, DNA sequencing, and phylogenetic analysis. For data analysis, absolute and relative frequency calculations were used, and parametric and / or nonparametric tests considering p <0.05 for significant values. Results: After TCPH, there was a change in the intestinal microbiota of the patient of the present study, mainly in the increase of bacteria of the genera Bacteroides, Prevotella, Ruminococcus, Blautia, Faecalibacterium, Parabacteroides, Oscillospira, Veillonella and Eubacterium. In addition, the important indicator of intestinal microbiota health was the summed percentage of Firmicutes and Bacteroidetes (F + B) in relation to the total, whose normal range should be between 85% and 95%. In this sequencing, the F + B indicator was within the desirable range after TCPH. Results also include statistically significant differences between all taxonomic comparisons within each taxonomic level (“Before” vs. “After”), with p <0.05 for nonparametric data. Conclusion: The present study demonstrated the importance of microbiota investigation in Crohn's disease, as the exact etiology of these diseases is not yet fully understood. Thus, there was a better microbiota composition after TCPH leading to a discussion of whether the disease activity leads to a microbiota change or whether its improvement is related to the outcome of the procedure or the TCPH result can be more stable.
Palavras-chave: Doença de Crohn
Crohn Disease
Microbioma Gastrointestinal
Gastrointestinal Microbiome
Transplante de Células-Tronco Hematopoéticas
Hematopoietic Stem Cell Transplantation
Área(s) do CNPq: CIENCIAS DA SAUDE::MEDICINA
Idioma: por
País: Brasil
Instituição: Faculdade de Medicina de São José do Rio Preto
Sigla da instituição: FAMERP
Departamento: Faculdade 1::Departamento 1
Programa: Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde
Citação: Faria, Mikaell Alexandre Gouvea. Análise da microbiota intestinal em paciente com doença de Crohn pré e pós-transplante de medula óssea. 2019. 57 f. Dissertação (Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde) - Faculdade de Medicina de São José do Rio Preto, São José do Rio Preto.
Tipo de acesso: Acesso Aberto
Identificador do documento: 1523
URI: http://bdtd.famerp.br/handle/tede/637
Data de defesa: 5-Jul-2019
Aparece nas coleções:Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde

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